пн-пт | 08:00-21:00 |
сб | 08:00-19:00 |
Синонимы
Динамический анализ функции тромбоцитов, проточная агрегатометрия, исследование функции тромбоцитов в условиях гемодинамического сдвига, агрегация тромбоцитов с коллагеном и АДФ. Индуцированная агрегация тромбоцитов.
Краткое описание
Это исследование способности тромбоцитов соединяться друг с другом в агрегаты под действием индукторов агрегации – коллагена и аденозиндифосфорной кислоты (АДФ). Исследование применяется для оценки в условиях, максимально приближенных к физиологическим, сосудисто-тромбоцитарного звена гемостаза, агрегантной и адгезивной функции тромбоцитов, диагностики врожденных и приобретенных тромбоцитопатий, болезни Виллебранда, риска тромбозов и кровотечений, нарушения чувствительности к аспирину и контроля за антиагрегантной терапией. Исследование агрегации тромбоцитов - единственное из всех клинических лабораторных исследований, проводимое на живых клетках.
Исследуемый биоматериал
Кровь из вены.
Подготовка к исследованию
За 30 минут перед взятием крови нужно соблюдать покой, не нервничать, не курить. Пациенту необходимо обязательно сообщить медицинскому персоналу о всех получаемых им лекарственных препаратах.
Факторы, влияющие на результаты
Определяемая в ходе исследования функциональная активность тромбоцитов, их способность к агрегации и адгезии может занижаться проводимой антиагрегантной терапией, приемом аспирина, адреноблокаторов, нестероидных противовоспалительных средств (НПВС), стероидных гормонов, ингибиторов АПФ, гормональных контрацептивов, антибиотиков, антибактериальных препаратов, антидепрессантов, мочегонных, клофибрата, дипиридамола, пропроналола. К получению завышенных результатов может приводить курение.
Подробная информация об исследовании
Агрегация тромбоцитов – важный и обязательный этап свертывания крови, необходимый для формирования тромба и остановки кровотечения. Активная агрегация тромбоцитов способствует образованию тромбов, сниженная – увеличивает риск кровотечений. При избыточной агрегации в первую очередь нарушается проходимость капилляров и мелких сосудов. Это может привести к ухудшению кровоснабжения головного мозга и развитию инсульта.
Коллагены – одни из самых распространенных белков, к ним относится 25% всего белка в организме человека. Коллаген входит в состав межклеточного матрикса и соединительных тканей. Он образует эластичный каркас сосуда и находится под эндотелием, в так называемом субэндотелиальном слое сосудистой стенки. Пока коллаген прикрыт эндотелиальными клетками, он не оказывает влияния на свертывающую систему крови. При повреждении сосуда и нарушении целостности эндотелия, коллаген вступает в непосредственный контакт с клетками и компонентами плазмы крови, активируя гемостаз. В этих процессах большое значение имеет действие, которое коллаген оказывает на тромбоциты. Оно реализуется через рецепторы на поверхности тромбоцитов и компоненты плазмы крови.
Среди компонентов плазмы крови наиболее важные функции по взаимодействию с тромбоцитами выполняет фактор Виллебранда. Этот высокомолекулярный гликопротеид синтезируется в эндотелиальных клетках, содержится в гранулах самих тромбоцитов. Коллаген обладает высоким сродством к фактору Виллебранда. Связываясь с рецептором GPIb-V-IX на поверхности тромбоцитов и коллагеном, фактор Виллебранда играет роль молекулярного «клея», обеспечивая адгезию тромбоцитов к поврежденному участку сосудистой стенки. Это не единственный механизм тромбоцитарной адгезии. На поверхности тромбоцитов есть еще специфические рецепторы GPIa-IIb и GPVI для непосредственной связи с коллагеном. Эти рецепторы тоже обеспечивают адгезию тромбоцитов к области повреждения сосуда. Коллаген обеспечивает не только адгезию тромбоцитов. Связываясь с рецепторами GPIa-IIb, GPVI и через фактор Виллебранда с рецепторами GPIb-V-IX, коллаген интенсивно активирует тромбоциты.
Аденозиндифосфорная кислота (АДФ) – это один из естественных физиологических активаторов тромбоцитов. Она содержится в гранулах внутри самих тромбоцитов, накапливается в крови в области повреждения сосуда. Связываясь с P2Y12 рецепторами на мембране тромбоцитов, АДФ активирует их. В ответ тромбоциты меняют свою форму, у них появляются псевдоподии (отростки), на их поверхность выделяются вещества с прокоагулянтными свойствами. На поверхности тромбоцитов появляются GPIIb-IIIa рецепторы (для фибриногена) и развивается первичная кальций-зависимая агрегация.
В ответ на активацию коллагеном и АДФ тромбоциты меняют свою форму, у них появляются псевдоподии (отростки). Происходит активация простагландин-тромбоксановой системы, из внутренних гранул тромбоцитов в кровь высвобождаются содержащиеся в них собственные эндогенные индукторы (фактор Виллебранда, β-тромбоглобулин, тромбоспандин, фибронектин, фибриноген, 4-й тромбоцитарный фактор, факторы свертывания V и XIII, др.), обладающие сильными проагрегантными свойствами. На поверхности активированных тромбоцитов «включаются» GPIIb-IIIa рецепторы. С помощью этих рецепторов тромбоцит связывает на своей поверхности до 40000 молекул фибриногена. Формирующиеся «фибриновые мостики» соединяют тромбоциты между собой – это основной механизм агрегации тромбоцитов. GPIIb-IIIa рецепторы связываются не только с фибриногеном, но и с фактором Виллебранда, что важно для эффективной агрегации и адгезии тромбоцитов в условиях высокой скорости кровотока. Так адгезия к субэндотелиальным, содержащим коллаген структурам и действие коллагена на тромбоциты ведет к их рецепторной активации, выбросу индукторов из гранул хранения и в итоге – к развитию интенсивной агрегации.
Индуцированная коллагеном и АДФ агрегация тромбоцитов – важный и обязательный этап свертывания крови, необходимый для формирования тромба и остановки кровотечения. Активная агрегация тромбоцитов способствует образованию тромбов, сниженная – увеличивает риск кровотечений.
При потоковой динамической агрегатометрии, в отличие от оптической агрегатометрии (по Борну), используется цельная кровь. Само исследование, как следует из его названия, проводится в потоке, то есть в условиях гемодинамического сдвига, для чего используются одноразовые картриджи. Устройство картриджа моделирует агрегацию тромбоцитов в поврежденном сосуде, регистрируя время, которое занимает этот процесс.
Образование агрегатов происходит на микромембране при прохождении через нее крови под давлением. На мембрану нанесены индукторы агрегации – коллаген и АДФ. Кровь пропускается через апертуру в мембране со скоростью, имитирующей условия, в которых находятся тромбоциты в сосудистом русле. Окклюзия апертуры происходит по мере формирования тромбоцитарной «пробки» и регистрируется по изменению перфузионного давления в картридже. Это максимально приближает поточную динамическую агрегатометрию к естественным физиологическим условиям, за счет чего обеспечивается учет всех этапов межклеточных взаимодействий, активации, адгезии и агрегации тромбоцитов.
Важное преимущество потоковой динамической агрегатометрии состоит в том, что ее результат зависит не только от свойств тромбоцитов, но также их концентрации и реологических свойств крови. В отличие от оптической или импедансной агрегатометрии, потоковая динамическая агрегатометрия дает врачу количественную и визуально понятную оценку замедления сосудисто-тромбоцитарного гемостаза. Малое время исследования позволяет быстро получить результат, оценить риск возникновения у пациента кровотечений или тромбозов.
Показания к назначению
Обследование назначается при склонности к кровотечениям или тромбозам, диагностике болезни Виллебранда, врожденных и наследственных тромбоцитопатий, сердечно-сосудистых заболеваниях, контроле за антиагрегантной терапией.
Референсный интервал нормальных значений
62-100 секунд.
Интерпретация результата
Результатом исследования является агрегатограмма. Это график, иллюстрирующий замедление скорости кровотока через апертуру картриджа по мере образования тромбоцитарных агрегатов в процессе исследования.
Чем медленнее снижается скорость кровотока и чем позднее наступает полная окклюзия апертуры, тем более замедлен сосудисто-тромбоцитарный гемостаз. Соответственно, тем больше риск развития геморрагического синдрома, прежде всего по микроциркуляторному типу. Верно и обратное. Чем быстрее снижается скорость кровотока и чем раньше происходит полная окклюзия апертуры, тем больше риск развития тромбозов, связанных с нарушением сосудистой микроциркуляции.
Большей чувствительностью поточная динамическая агрегатометрия обладает при диагностике геморрагических нарушений, а не тромбофилий. Это связано с диапазоном изменения скорости кровотока через апертуру картриджа.
Отклонения от нормы характерны для врожденных и приобретенных тромбоцитопатий, проявляющихся нарушением адгезии и агрегации (болезнь Виллебранда, синдром Бернара-Сулье, тромбастения Гланцмана, синдром Скотта, дефекты пулов хранения и др.), а также проводимой антиагрегантной терапии.
Например, при болезни Виллебранда, синдроме «серых» тромбоцитов, дефиците так называемых плотных гранул, дефиците активности тромбоцитарных фосфолипаз и тромбоксансинтетазы, тяжелой гипофибриногенемии и афибриногенемии окклюзия аппертуры картриджа замедляется в несколько раз. При тромбастении Гланцмана окклюзия апертуры не наступает за все время исследования.
Антиагрегантная терапия вызывает резкое, дозозависимое замедление окклюзии апертуры. Аспирин и другие НПВС ведут к более умеренному (по сравнению с блокаторами P2Y12 рецепторов) замедлению окклюзии апертуры. Во всех случаях интерпретация поточной агрегатометрии требует опыта и знания используемого оборудования.
Метод исследования
Анализ функции тромбоцитов методом индуцированной агрегатометрии в условиях гемодинамического сдвига.
Единицы измерения
Секунды.
Используемое оборудование
Агрегометр «PFA-200» («Siemens Healthcare Diagnostics», США)